差速离心关键是采取逐渐提高离心速度的方法分离不相同大小的细胞器。起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,由此得出,到了分离不相同大小颗粒的目的。
如果不特别说明,离心一般是在一定的转速下进行一段时间,将要分离的东西分开:
1、而差速离心则是用一定的转速将物质分成两部分后,将上清液再用更高的转速离心,分成层后如果需要还要用更高的转速再将上清液离心,直到将物质完全分成不同的层次为止.是交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离;
2、使用离心法时,大分子沉降速度的量度,等于每单位离心场的速度。或s=v/ω2r。s是沉降系数,ω是离心转子的角速度(弧度/秒),r是到旋转中心的距离,v是沉降速度;
3、沉降系数以每单位重力的沉降时间表示,并且通常为1~200×10-13秒范围,10-13这个因子叫做沉降单位S,即1S=10-13秒,如血红蛋白的沉降系数约为4×10-13秒或4S。大多数蛋白质和核酸的沉降系数在4S和40S之间,核糖体及其亚基在30S和80S之间,多核糖体在100S以上。